HLA分型方法目前主要有如下三种:
HLA分型方法目前主要有如下三种:
HLA分型方法目前主要有如下三种:
1) 血清学分型法:常规采用微量补体依赖细胞试验常用以测定HLA-A、B、C系列抗原。
2) 细胞学分型法:采用混合淋巴细胞反应,可测定HLA-D、DP系列的抗原。
3) DNA分型法:发展迅速,方法很多,如PCR和NGS等技术。血清学和细胞学分型技术主要侧重于分析HLA抗原的特异性,DNA分型法则侧重于分析基因本身的多态性,随着分子生物学技术的不断发展,DNA分型已成为HLA分型的主要方法。
三、 HLA基因在肿瘤免疫治疗中研究
作为肿瘤相关抗原提呈的独立因素,人类白细胞抗原-Ⅰ(HLA-Ⅰ)在抗肿瘤免疫应答和新生肿瘤进展方面扮演着重要的角色。理论上,更多样化的HLAⅠ类基因将会引起更广泛的抗原提呈,增加呈现更多免疫原性抗原的可能性,并增加从ICB获益的可能性。
Chowell, D.et al在2017年首次报道了HLA-I的胚系基因型和体系LOH情况对ICI疗法反应的研究。该研究对超过1535名使用ICI治疗的癌症患者分析发现,在给定个体中更多样化HLA-I分子(即HLA-I杂合性)的存在与生存期的增加相关,这可能是由于这种多样性的存在能够向T细胞提供更广泛的肿瘤抗原。进一步研究发现,HLA-I杂合性对ICI治疗后存活率增加的影响似乎主要与HLA-B和HLA-C基因座相关,这可能是因为HLA-B编码的MHC结合了更多样的多肽,而HLA-C通常在抗原呈递细胞中的表达水平高于其他细胞类型。此外,当考虑TMB时,HLA-1杂合性与生存期延长的关联也得到了增强。相比HLA-I基因座为纯合子的抗PD-1治疗患者而言,所有HLA-I基因座上均为杂合子的患者的TCR治疗克隆性较高。换言之,HLA杂合子患者能够更好地克隆其TCR组库。
该研究还发现一些HLA-B44超型等位基因与接受ICIs治疗的黑色素瘤患者的存活率提高有关。HLA-B44超型中的大多数等位基因共享锚定位置2的谷氨酸(E)和羧基末端的极性和疏水残基。而黑色素瘤中最富集的氨基酸突变之一是G>E,这表明在黑色素瘤中可能存在HLA-B44限制性的由肿瘤衍生的突变表位呈递富集。
这些观察结果强调需要了解癌种的突变特征和患者的HLA-I基因型是如何相互作用以影响肿瘤细胞中新表位组库的呈递。除了HLA-B44等位基因可能富集的新表位之外,以往鉴定的黑素瘤中常见的肿瘤特异性抗原是HLA-B44限制性的,包括可由HLAB*44:03和HLAB*18:01呈现的睾丸抗原(MAGEA3)。HLAB*44:03和HLAB*18:01均为B44成员。
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