hla高分配型结果怎么看
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HLA分型
HLA分型并不只是一种应用性的临床检测指标,免疫遗传学研究的发展,很大程度上依赖于以分型为主要手段的HLA多态性分析。
一、血清学分型法
血清学分型法,是应用一系列已知抗HLA的特异性标准分型血清与待测淋巴细胞混合,借助补体的生物学作用介导细胞裂解的细胞毒试验。因分型血清和淋巴细胞用量少,称为补体依赖的微量细胞毒(CDC)试验。能够应用该法检测的抗原称为SD抗原,包括HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-DR、HLA-DQ。
二、细胞学分型法
细胞分型法,是以混合淋巴细胞培养(**C)或称混合淋巴细胞反应(**R)为基本技术的HLA分型法。能用本法测定的抗原称为LD抗原,包括HLA-D、HLA-DP。**C又有单向和双向之分。
(一)单向**C
根据选用的刺激细胞类型,可将单向**C分为阳性和阴性分型法。
1.阴性分型法
又称纯合子细胞分型法。
2.阳性分型法
阳性分型法又称预致敏淋巴细胞分型法(PLT)。
HLA-D抗原可用阴性和阳性分型法检测,HLA-DP抗原只用阳性分型法检测。
(二)双向**C
遗传型不同的两个个体淋巴细胞在体外混合培养时,由于两者HLA不同,能相互刺激导致对方淋巴细胞增殖,故称双向**C。
本法不能判断型别,只能说明供、受体HLA抗原配合程度,双向**C强度与两个体间HLA抗原差异成正比,器官或细胞移植时,应选择**C最弱者为供体。
三、分子生物学分型法
(一)RFLP与PCR-RFLP分型法
限制性片段长度多态性(RFLP)分析,是最早建立的研究HLA多态性的DNA分型技术。这种HLA分型法称为DNA-RFLP。若对DN**段进行体外扩增,然后再用限制性内切酶进行酶切分析,可使限制性长度分析的敏感度大大增加,此类引入DNA体外扩增技术的限制性片段长度多态性分析则称为PCR-RFLP分型法。
PCR-RFLP分型法所应用的PCR引物为HLA组特异性的,此法特别适应于小量标本的研究和异基因骨髓移植供者的选择。
(二)PCR-SSO分型法
序列特异性寡核苷酸-聚合酶链反应(PCR-SSO)是PCR与杂交相结合的技术,从而对扩增产物作出HLA型别判断。
PCR-SSO是Ⅱ类HLA分型应用最广泛的方法,能够鉴定所有已知序列的HLA-DR、HLA-DQ、HLA-DP等位基因。
基因芯片是近年发展起来的一项新技术,将其与PCR-SSO结合应用于HLA分型,可使分型趋于规模化和自动化,尤其在HLA多态性和疾病遗传背景分析等方面更具优势。
(三)PCR/SSP分型法
该方法应用设计的一套HLA等位基因的序列特异性引物(SSP),对待测DNA进行PCR扩增,从而获得HLA型别特异性的扩增产物。
(四)PCR-SSCP分型法
单链构象特异性-聚合酶链反应(PCR-SSCP),是以待测基因PCR扩增为基础,对扩增的DNA单链(ssDNA)的HLA分型方法。
(五)SBT分型法
基于序列的HLA分型法(SBT),可通过对扩增后的HLA基因片段进行的核酸序列测定判断HLA型别。
除上述方法外,业已建立的HLA基因分型技术还有PCR异源二聚体电泳多态即PCR指纹图分析、虚拟DNA分析、嵌合体测定、差异显示PCR、扩增非变异突变系统或扩增阻滞突变系统(ARMS)等。
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