HLA抗体的临床意义及检测技术 - HLA基因检测新闻
HLA抗体发现迄今至少有35年,并被证实与多种移植失败密切相关 ：妊娠,输血,移植和细菌感染所致的交叉致敏等,都会产生各种抗体,这些抗体主要为抗HLA的抗体,少量为红细胞抗体和非HLA抗体.
HLA抗体的临床意义
1 与器官移植的关系:许多资料表明,HLA抗体可以导致针对移植物的免疫反应而发生超急排和加速性排斥反应,使移植失败或降低移植物存活率.在器官移植中,供受双方的HLA相容性越大,移植成功率越高.
最近一项国际合作的研究结果显示,对36个移植中心的4763例器官移植患者检测HLA抗体,肾移植HLA抗体检出率是20. 9%,肝移植19. 3%,心脏移植22. 8%,肺脏移植14.2%.
另一项在23个肾移植中心开展的检测HLA抗体预测移植1年内失败频率的研究中, 2278例肾移植病人中有HLA抗体的移植失败率为6. 6% ;
1778无HLA抗体的病人移植失败率为3. 3%.结果显示有HLA抗体移植病人的失败率明显高于无抗体的病人.
2 与输血的关系:HLA抗原存在于所有的有核细胞,在淋巴细胞上的密度最高,幼稚红细胞和血小板都带有HLA抗原.因此在输注全血,红细胞悬液,粒细胞,血小板等血液成分时都有可能发生因HLA抗原型不同而引起的各类非溶血性输血反应,影响输血治疗的效果.
3 与妊娠的关系:妊娠妇女由于母胎HLA不合或输血免疫反应可以产生白细胞抗体,抗体随着妊娠次数的增加而相应增高.这种HLA抗体属于IgG,可以通过胎盘,使胎儿产生同种免疫性中性粒细胞减少症及同种免疫性血小板减少性紫癜.
现代免疫学认为,母胎HLA相容性越大,母体就不能识别胚胎抗原,就不能产生封闭抗体,胚胎得不到封闭抗体的保护而遭排斥,即产生病理性妊娠.有资料表明HLA抗体与病理性妊娠如流产,不孕,妊高症和早产等均有一定关系.
4. HLA-B27，是一种基因产物--B27 型人类白血球抗原(Humen Leukocyte Antigen B27)的英文简写，与僵直性脊椎炎的关系非常密切。
据统计， 僵直性脊椎炎的病人当中，有百分之九十五带HLA-B27基因(即HLA-B27 阳性)。 在中国，有 5.5%的人带有HLA-B27基因，这些人当中，有 10-20%的机率以后将患僵直性脊椎炎。
HLA抗体的检测方法
1 微量淋巴细胞毒实验(CDC):该实验是由美国洛杉矶加州大学的Pau l.Terasak i教授于1964年创建.主要原理是淋巴细胞具有HLA抗原,HLA抗体能结合到带有相应抗原的淋巴细胞膜上,补体可以结合并在淋巴细胞膜上使其死亡.
如果淋巴细胞不带有相应的抗原,则无此作用.通过染色来观察细胞是否死亡来确定相应的抗原或抗体.该方法可迅速检测患者的HLA抗体,但需要分离细胞,抗原用量大且敏感性不高,多年来在临床广泛应用.
2 酶联免疫法(ELISA):该实验的基本原理是将HLA抗原包被在一个孔内,将患者血清加入孔中与孔内的HLA抗原反应,通过酶作用使其显色,用荧光仪根据吸收光的不同来判断结果.
这种方法无需分离细胞,敏感性也有所提高,无需专门仪器设备,同时可检出HLA-I类和HLA-II类抗体.但该方法操作繁琐,也较费时,一次只能检测一个指标,因此临床应用受到一定限制.
3 流式细胞仪法(Flow Cytometry)及单抗原磁珠法:将HLA单价抗原包被在不同颜色的微磁珠表面,用被检测血清与磁珠反应,血清中HLA特异性抗体便与包被在磁珠上的抗原结合,然后再与标记PE的二抗孵育.根据荧光强弱通过流式细胞仪检测出与这些磁珠对应的HLA抗体.
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